实时荧光定量PCR分析仪(qPCR仪)是***种在PCR扩增过程中,以荧光化学物质测定每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。以下是关于它的详细介绍:
***、基本原理
荧光标记探针或染料:在PCR反应体系中加入荧光标记的探针或染料,这些物质会随着PCR反应的进行而释放出荧光信号。
实时监测荧光信号:通过实时监测荧光信号的增加来测量PCR反应的进行程度。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,因此可以成为定量的依据。
二、主要特点
高灵敏度:能够检测到极低浓度的目标DNA或RNA分子。
高特异性:通过特异性引物和探针对目标序列进行精确识别和扩增。
宽线性范围:可以在较宽的浓度范围内进行定量分析。
快速自动化:现代实时荧光定量PCR仪通常具有快速升降温能力和自动化功能,能够在短时间内完成大量样品的检测。
低样本要求:对样本数量和质量要求相对较低,适用于各种来源的样本。
三、应用领域
病原体检测:用于检测病毒、细菌等微生物的感染情况,如新冠病毒核酸检测。
基因表达分析:研究基因在不同组织或细胞中的表达水平差异。
遗传疾病诊断:检测与遗传性疾病相关的基因突变或多态性。
药物研发:评估药物对特定基因表达的影响以及治疗效果。
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