准备工作
样本准备:收集需要检测的组织样本,通常为病理切片或涂片。
染色剂准备:准备石炭酸复红(carbol fuchsin)作为初染剂,以及盐酸酒精(HCl乙醇)作为脱色剂,以及美蓝(methylene blue)作为复染剂。
染色步骤
初染:将样本放入抗酸染色机中,加入适量的石炭酸复红染色液,让样本在染色液中浸泡一段时间,通常为15-30分钟。染色液的温度应保持在室温。
脱色:将样本从染色液中取出,立即放入盐酸酒精中进行脱色,脱色时间通常为1-2分钟,直到样本呈现透明或淡黄色。
复染:将样本从脱色液中取出,立即放入美蓝染色液中进行复染,通常为1-2分钟。美蓝染色液的温度也应保持在室温。
清洗:将样本从美蓝染色液中取出,用蒸馏水或生理盐水清洗干净,直到清洗液不再呈现蓝色。
观察与记录
显微镜检查:将清洗后的样本置于显微镜下观察。抗酸性细菌在石炭酸复红染色后呈现红色,在美蓝复染后呈现蓝色,而非抗酸性细菌则仅在美蓝复染后呈现蓝色。
结果记录:记录下观察到的细菌形态、分布和数量,特别是抗酸性细菌的特征。
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