1. 准备工作环境准备:确保实验室环境清洁,温度和湿度符合要求,通常温度控制在37°C,湿度在95-98%。设备准备:准备培养箱、显微镜、移液器、培养皿、培养液、胚胎载体(如CO2培养箱)、消毒用品等。2. 培养液准备培养液配置:按照产品说明书或实验室标准操作程序(SOP)配置培养液。通常需要将冻存的培养液稀释至工作浓度。消毒:对培养液进行无菌处理,可以使用高压蒸汽灭菌或化学消毒剂。平衡:将消毒后的培养液在CO2培养箱中平衡至37°C和5% CO2的环境。3. 胚胎准备胚胎采集:从患者体内采集胚胎,通常是在体外受精(IVF)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)后。胚胎检查:检查胚胎的活力和发育情况,选择合适的胚胎进行培养。4. 培养过程移液:使用无菌技术将胚胎从采集容器转移到预先平衡好的培养液中。培养:将装有胚胎的培养皿放入CO2培养箱中,根据胚胎的发育阶段选择合适的培养时间。早期卵裂阶段:通常在培养箱中放置24-48小时。晚期卵裂阶段:可能需要更长时间,如72小时。5. 观察与记录定期观察:在显微镜下观察胚胎的发育情况,记录胚胎的分裂情况、形态变化等。数据记录:详细记录观察结果,包括胚胎数量、分裂情况、发育速度等。6. 胚胎移植或冷冻胚胎移植:根据临床需求,将发育良好的胚胎移植到母体子宫。胚胎冷冻:将胚胎冷冻保存,以备将来使用。7. 培养液更换定期更换:根据胚胎的发育阶段和实验室SOP,定期更换培养液,以维持培养环境的稳定。8. 安全与无菌操作无菌操作:在整个操作过程中,必须严格遵守无菌操作规程,以防止污染。
(文章来源于东方医疗器械网)