酶联免疫分析仪（通常指酶标仪或酶免疫测定仪）的工作原理主要基于酶促反应产生的光信号变化来定量分析样本中目标物质的含量。其核心过程可分为以下几个步骤：

‌免疫反应与酶标记‌：

仪器首先通过酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）原理进行检测。样本中的抗原或抗体与固相载体（如微孔板）上包被的特异性抗体或抗原结合，形成免疫复合物。随后加入酶标记的二抗或抗原（酶标物），与复合物结合，形成“固相抗原－抗体－酶标抗体”复合物。洗涤步骤去除未结合的物质，保留特异性结合的复合物。‌

‌酶促显色反应‌：

加入酶的底物（如ＴＭＢ或ＡＢＴＳ）后，酶催化底物发生化学反应，生成有色产物（如蓝色或黄色）。颜色的深浅与样本中目标物质的含量成正比（正比或反比关系，取决于检测模式），因为酶的催化作用会放大信号，提高检测灵敏度。‌

‌光吸收检测‌：

酶标仪通过光源发出单色光（波长由滤光片或单色器选择），照射微孔板中的样本。光穿过样本后，部分被有色产物吸收，剩余光强被光电检测器接收，并转换为电信号。仪器自动对每个孔进行多点扫描（如３５个点），取中心区域的平均值作为最终吸光度（ＯＤ值），以减少孔底不平整带来的误差。‌

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